期刊简介
本刊坚持以马克思主义、毛泽东思想为指导，遵循党的基本路线，贯彻理论与实践相结合，普及与提高相结合，“百花齐放，百家争鸣”的方针，坚持面向科研、教学、临床和防治，充分反映我国病原生物学的研究水平，促进我国病原生物学事业的发展。
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首页>中国病原生物学杂志
- 杂志名称：中国病原生物学杂志
- 主管单位：中国寄生虫病防治杂志
- 主办单位：中华人民共和国卫生部
- 国际刊号：11-5457/R
- 国内刊号：11-5457/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中华预防医学会、系列杂志优秀期刊期刊收录：上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
弓形虫P24基因细胞内定位载体重组质粒的构建
彭碧文；郑大利；黄清玲；陈慧菁；林建银；蒋明森
关键词：弓形虫, 致密颗粒蛋白P24, 基因克隆, 细胞内定位
摘要：目的构建编码弓形虫RH株P24基因的细胞内定位载体并进行其序列测定.方法弓形虫RH株腹腔接种小鼠,收集腹水,Trizol试剂盒抽提基因组RNA;根据基因库P24基因序列设计合成引物,采用RT-PCR法扩增编码P24的基因片段,经低熔点琼脂糖法回收并纯化;将P24基因定向克隆到细胞内定位载体pCMV/myc系列:pCMV/myc/cyto(胞质定位)、pCMV/myc/nuc(核定位)、 pCMV/myc/mito(线粒体定位)及pCMV/myc/ER(内质网定位).转化大肠杆菌TOP10感受态细胞,在氨苄青霉素阳性LB培养基平板上筛选出阳性克隆.重组子经双酶切,PCR鉴定,后对重组子进行序列测定.结果RT-PCR方法从弓形虫RH株扩增572 bp的P24基因片段,分别构建重组质粒pCMV/myc/cyto-P24、 pCMV/myc/nuc-P24、 pCMV/myc/mito-P24和pCMV/myc/ER-P24,酶切和PCR鉴定产物大小与预期值相符合,序列测定分析进一步表明所克隆的基因为编码P24抗原的基因片段.结论成功构建编码弓形虫表面抗原P24基因真核细胞内定位载体重组质粒pCMV/myc/cyto-P24、pCMV/myc/nuc-P24、pCMV/myc/mito-P24和pCMV/myc/ER-P24.
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