期刊简介

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  • 杂志名称:中国病原生物学杂志
  • 主管单位:中国寄生虫病防治杂志
  • 主办单位:中华人民共和国卫生部
  • 国际刊号:11-5457/R
  • 国内刊号:11-5457/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中华预防医学会、系列杂志优秀期刊期刊收录:上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
中国病原生物学杂志2003年第02期

抗囊虫单抗的制备及其应用研究

殷竹君;张耀娟;章子豪;刘静;史志明;侯敏

关键词:猪囊虫, 尿素溶性抗原, 水溶性抗原, 单克隆抗体, ELISA
摘要:目的制备分泌特异性抗猪囊虫单抗的杂交瘤细胞株,建立以特异性单抗检测囊虫病患者循环抗原(CAg)的特异敏感的ELISA方法. 方法制备水溶性抗原(Ag-w)和尿素溶性抗原(Ag-u),将实验用BALB/c小鼠分为Ag-u和Ag-w组,分别以Ag-u和Ag-w免疫,取两组免疫鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,ELISA法进行筛选,所获特异性阳性克隆加以扩大培养,并分别与包虫、血吸虫、华支睾吸虫、肺吸虫、姜片虫和丝虫抗原进行交叉反应性测定. 结果获得稳定分泌特异性抗囊虫单抗的杂交瘤细胞5株,其中1株N1B10来自于Ag-w组,另4株U2A6、U2B3、UB5H6和UE10H5来自于Ag-u组.对N1B10、U2A6和U2B3初步鉴定结果表明,其抗体类型分别为IgG2b、κ,IgG1、κ,IgG2b、κ;腹水的效价分别为1.024×106、1.6×104和3.2×104;免疫组化显示N1B10定位于囊虫囊壁的基底膜,U2A6和U2B3定位于囊虫的头节.杂交瘤细胞经连续培养,液氮反复冻存复苏后仍能稳定分泌单抗.取3株单抗和兔抗囊虫血清建立了检测囊虫病患者CAg的ELISA方法,测定48份临床确诊囊虫病病人血清,阳性率达95.8%. 结论成功制备了抗囊虫单克隆抗体,所建立的ELISA方法敏感性高,特异性强,可用于囊虫病患者CAg的检测.