期刊简介

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  • 杂志名称:中国病原生物学杂志
  • 主管单位:中国寄生虫病防治杂志
  • 主办单位:中华人民共和国卫生部
  • 国际刊号:11-5457/R
  • 国内刊号:11-5457/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中华预防医学会、系列杂志优秀期刊期刊收录:上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
中国病原生物学杂志2004年第06期

弓形虫表面抗原SAG2的DNA疫苗载体构建及在Vero细胞中的表达

龙彩虹;吴少庭;翁亚彪;高世同;张仁利;林绮萍;谢德华;卜春玲;雷明军;黄达娜

关键词:弓形虫, SAG2, 基因克隆, 表达
摘要:目的构建弓形虫表面抗原SAG2的DNA疫苗载体,并在Vero细胞中表达. 方法设计1对引物,从弓形虫RH株速殖子基因组DNA中扩增SAG2全长编码基因,构建pVAX1-SAG2真核表达重组质粒.以限制性内切酶KpnⅠ和 EcoRⅠ进行双酶切、PCR鉴定,纯化后进行测序鉴定.脂质体介导法瞬时转染Vero细胞,同时以pVAX1为对照,48 h后收集细胞, Western-blot鉴定. 结果从弓形虫RH株DNA中扩增出了577 bp的SAG2基因,构建了真核表达载体pVAX1-SAG2,在质脂体介导下转染Vero细胞,质粒DNA成功的转染到细胞中.通过Westen-blot分析,细胞裂解液样品有1条可被弓形虫免疫血清所识别的约17 ku大小的条带,与预计大小一致. 结论真核表达载体pVAX1-SAG2在Vero细胞中有一定表达,且有一定的活性.