期刊简介

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  • 杂志名称:中国病原生物学杂志
  • 主管单位:中国寄生虫病防治杂志
  • 主办单位:中华人民共和国卫生部
  • 国际刊号:11-5457/R
  • 国内刊号:11-5457/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中华预防医学会、系列杂志优秀期刊期刊收录:上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
中国病原生物学杂志2005年第02期

刚地弓形虫P30(SAG1)基因的克隆与表达

张佃波;公茂庆;魏庆宽;李谨;黄炳成;刘克义

关键词:刚地弓形虫, P30基因, 蛋白表达
摘要:目的构建弓形虫P30基因表达载体并获得重组表达蛋白. 方法将弓形虫P30基因的开读框用PCR扩增,NcoⅠ和HindⅢ酶切后,与同样酶切的表达质粒pET-30a(+)经T4连接酶连接,然后转化到DH5α中.菌液经PCR扩增和质粒酶切及基因测序鉴定后,将阳性重组质粒转化到大肠埃希菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,表达产物用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定. 结果扩增的P30基因片段为750 bp,重组质粒诱导表达产物分子质量单位为30 ku,与理论值相符 .Western blot 确认重组质粒表达蛋白与小鼠抗弓形虫单克隆抗体(P30 McAb)发生特异性反应. 结论成功构建重组体并获得弓形虫主要表面抗原P30的高效表达产物,为弓形虫病的诊断和疫苗研究奠定了基础.