期刊简介

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  • 杂志名称:中国病原生物学杂志
  • 主管单位:中国寄生虫病防治杂志
  • 主办单位:中华人民共和国卫生部
  • 国际刊号:11-5457/R
  • 国内刊号:11-5457/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中华预防医学会、系列杂志优秀期刊期刊收录:上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
中国病原生物学杂志2007年第05期

2株重组弓形虫P30抗原单克隆抗体的制备和鉴定

王际平;杨秋林;蔡亮;张如胜;张愉快;邱玉华

关键词:重组P30抗原, 杂交瘤技术, 单克隆抗体, 双单抗夹心-ELISA, 循环抗原
摘要:目的 制备重组P30抗原单克隆抗体,研究其生物活性.方法 重组质粒pET28b-P30经BL21 (DE3)表达,纯化、复性后免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备单克隆抗体.ELISA筛选阳性克隆,经亚克隆建株.体内诱生腹水法制备抗体,测定其亚类、效价,Western blot分析其特异性,双单抗夹心-ELISA测定其敏感度.双单抗夹心-ELISA法检测弓形虫感染鼠血清中的CAg.结果 筛选出2株抗重组P30的单克隆抗体9D7、2H9, 抗体重链分别为IgG2a、 IgG1, 轻链均为κ链, Western blot显示2株单抗均能识别弓形虫速殖体天然P30抗原.双单抗夹心-ELISA检测抗原量为0.5 μg/ml;同法检测鼠血清中的CAg,感染第4、6、8 d的阳性率分别为20%、60%、60%.结论 制备的P30抗原单克隆抗体具有较高的敏感性和特异性,为其应用研究打下了基础.