期刊简介

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  • 杂志名称:中国病原生物学杂志
  • 主管单位:中国寄生虫病防治杂志
  • 主办单位:中华人民共和国卫生部
  • 国际刊号:11-5457/R
  • 国内刊号:11-5457/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中华预防医学会、系列杂志优秀期刊期刊收录:上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
中国病原生物学杂志2008年第03期

TaqMan MGB Real-time RT-PCR 检测西尼罗病毒方法的建立

郑夔;周惠琼;柯昌文

关键词:西尼罗病毒, Taqman MGB探针, Real-time RT-PCR
摘要:目的 建立一种灵敏、特异、高效的西尼罗病毒(West Nile virus, WNV)感染诊断和流行病学调查的实验室检测方法. 方法 用C6/36细胞培养WNV并用Vero细胞蚀斑法滴定病毒浓度;根据WNV C蛋白基因组保守序列,设计一套特异性引物和TaqMan MGB探针,用细胞培养病毒液进行方法的条件优化;用不同病毒评价方法的特异性,用系列浓度病毒稀释液和染毒蚊子评价方法的灵敏性. 结果 建立的TaqMan MGB Real-time RT-PCR方法可检出低于0.01 PFU的WNV RNA,并可检出只含3只染毒蚊的标本;用该方法检测4种血清型登革病毒标准毒株、日本脑炎病毒、麻疹病毒、基孔肯亚病毒均为阴性. 结论 新建TaqMan MGB Real-time RT-PCR方法具有极高的特异性和灵敏性,是实验室早期诊断WNV感染和调查媒介携带WNV情况的理想方法.