期刊简介

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  • 杂志名称:中国病原生物学杂志
  • 主管单位:中国寄生虫病防治杂志
  • 主办单位:中华人民共和国卫生部
  • 国际刊号:11-5457/R
  • 国内刊号:11-5457/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中华预防医学会、系列杂志优秀期刊期刊收录:上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
中国病原生物学杂志2012年第07期

细粒棘球绦虫DNA聚合酶δ小亚基EgPolD2基因的克隆及序列分析

吕国栋;叶建蔚;张传山;王俊华;李亮;温浩;林仁勇

关键词:细粒棘球绦虫, EgPolD2, 序列分析
摘要:目的 从新疆株细粒棘球绦虫原头蚴中克隆DNA聚合酶δ小亚基EgPolD2,进行序列测定和生物信息学分析.方法 设计EgPolD2特异性引物,用RT PCR方法从细粒棘球绦虫原头蚴cDNA中克隆EgPolD2基因,然后将其克隆至pMD18 T载体,测序并进行生物信息学分析,半定量反转录PCR分析其在细粒棘球绦虫原头蚴和囊泡中的表达情况.结果 EgPolD2基因开放阅读框为1218 bp,编码405个氨基酸,等电点为4.74.NCBI保守功能区分析软件预测EgPolD2蛋白第113~378个氨基酸为MPP_PolD2_C结构域.登陆GenBank进行Blast比对,EgPolD2与曼氏血吸虫SmPolD2基因同源性为32.1%,与线虫和人等其他物种PolD2基因同源性在18.3%~22.8%之间.进化树分析表明EgPolD2与SmPolD2相聚集,与其他物种同源性较低.半定量RT-PCR显示,EgPolD2在细粒棘球绦虫原头蚴和囊泡中均有表达,且表达水平差异无统计学意义(P>0.05).结论 本实验成功克隆出细粒棘球绦虫EgPolD2新基因,为进一步研究抗细粒棘球绦虫药物靶标奠定了基础.