期刊简介

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  • 杂志名称:中国病原生物学杂志
  • 主管单位:中国寄生虫病防治杂志
  • 主办单位:中华人民共和国卫生部
  • 国际刊号:11-5457/R
  • 国内刊号:11-5457/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中华预防医学会、系列杂志优秀期刊期刊收录:上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
中国病原生物学杂志2012年第03期

球形芽胞杆菌S层蛋白基因的克隆及原核表达

杨李;周鹰;王运刚;马桂芳;崔玉宝

关键词:S层蛋白, 球形芽胞杆菌, 基因克隆, 表达
摘要:目的 克隆球形芽胞杆菌S层蛋白的编码基因,实现其原核表达并纯化表达产物. 方法 提取球形芽胞杆菌菌体基因组DNA,根据GenBank公布的核酸序列设计并合成引物,扩增S层蛋白编码基因sllB,与pMD19-T载体连接;测序验证后,构建原核表达质粒pET28 a (+)-sllB并转化BL21( DE3)中,经IPTG诱导表达,SDS-PAG和Western blot鉴定表达产物,亲和柱层析纯化重组蛋白. 结果 扩增获得S层蛋白编码基因sllB全长(3 306 bp),与参考序列同源性为97.5%.构建的原核表达质粒pET28 a (+)-sllB转化BL21( DE3)后,SDS-PAGE显示表达蛋白的分子质量为116 ku,与理论值相符.Western blot显示其全蛋白、可溶性蛋白和不溶性蛋白中均被鼠抗Penta-His抗体识别.结论 获得了球形芽胞杆菌S层蛋白编码基因sllB,并实现了其原核表达.