期刊简介
本刊坚持以马克思主义、毛泽东思想为指导，遵循党的基本路线，贯彻理论与实践相结合，普及与提高相结合，“百花齐放，百家争鸣”的方针，坚持面向科研、教学、临床和防治，充分反映我国病原生物学的研究水平，促进我国病原生物学事业的发展。
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首页>中国病原生物学杂志
- 杂志名称：中国病原生物学杂志
- 主管单位：中国寄生虫病防治杂志
- 主办单位：中华人民共和国卫生部
- 国际刊号：11-5457/R
- 国内刊号：11-5457/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中华预防医学会、系列杂志优秀期刊期刊收录：上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
基因转运载体中甲基化XbaⅠ位点的体外克隆与应用
王玉；于爱莲；姜世金；郭慧君；赵英会；于广福；施鲁笛
关键词：甲基化XbaⅠ, 重组克隆, 稳定性, 生物活性
摘要：目的 探讨基因转运载体中甲基化XbaⅠ位点在基因克隆中的效用. 方法 以pIRES2-EGFP为母本,PCR扩增获得携附加XhoⅠ位点和满足甲基化序列组成的Xba Ⅰ位点、同时缺失IRES和EGFP区段的载体骨架p△SG,其PCR产物与携带对等酶切位点的EGFP PCR产物经酶切、连接后,构建重组质粒rp△SG-EGFPV-Xho、rp△SG-EGFPV-Xba.另将p△SG和EGFP的PCR产物分别与pMD 18-T Simple T载体连接,构建重组质粒psT-△SG和psT-EGFP,并亚克隆获得重组质粒rp△SG-sT-EGFPV-Xho.以DsRed2基因置换rp△SG-sT-EGFPV-Xho中的EGFP基因,获得重组质粒rp△SG-sT-DsRed2V-Xho.各重组质粒经脂质体介导转染CHO细胞. 结果 各重组质粒转染的细胞中明显可见EGFP或DsRed2的高效表达. 结论 PCR产物中满足甲基化序列组成的XbaⅠ位点,在体外酶切与连接的克隆效果良好；该序列经体外重组并导入Dam+和/或Dcm+宿主菌中扩增时被重新甲基化而受保护,且对重组质粒在宿主细胞内的稳定性和生物活性没有明显影响.
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