期刊简介

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  • 杂志名称:中国病原生物学杂志
  • 主管单位:中国寄生虫病防治杂志
  • 主办单位:中华人民共和国卫生部
  • 国际刊号:11-5457/R
  • 国内刊号:11-5457/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中华预防医学会、系列杂志优秀期刊期刊收录:上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
中国病原生物学杂志2013年第05期

幽门螺杆菌CagA转运相关蛋白CagE、Cagδ及Cagβ的克隆表达及免疫反应性分析

宫雅楠;肖迪;张建中

关键词:幽门螺杆菌, 蛋白表达, 抗原性
摘要:目的 构建幽门螺杆菌ⅣV型分泌系统组分中与CagA转运相关蛋白cagE(HP0544)、cagδ(HP0522)及cagβ(HP0524)编码基因重组质粒,在大肠埃希菌中表达并分析表达蛋白的免疫反应性.方法 根据在线预测的3种蛋白信号肽及跨膜区特征,以标准菌株HP26695染色体DNA为模板扩增相关蛋白编码片段,与表达载体pET28a及pGEX4t-1连接后转入大肠埃希菌BL21(DE3)中诱导表达,分析蛋白表达状态,用Western blot检测表达蛋白与HP26695全菌蛋白免疫血清的反应.结果 测序及飞行质谱鉴定表明成功构建CagE、Cagδ及Cagβ的表达载体,其中Cagδ可大量可溶表达,CagE及Cagβ主要以包涵体形式表达.Western blot显示3种表达蛋白均能被HP26695全菌蛋白免疫血清识别,但Cagδ的免疫反应性较弱.结论 成功获得HP26695的与CagA转运相关CagE、Cagδ及Cagβ重组蛋白,其中CagE和Cagβ具有较好的免疫反应性,是潜在的药物靶点和诊断生物标志物.