期刊简介

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  • 杂志名称:中国病原生物学杂志
  • 主管单位:中国寄生虫病防治杂志
  • 主办单位:中华人民共和国卫生部
  • 国际刊号:11-5457/R
  • 国内刊号:11-5457/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中华预防医学会、系列杂志优秀期刊期刊收录:上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
中国病原生物学杂志2013年第03期

梅花鹿S100A4基因的克隆及原核表达

张英;李莉;郝林琳;刘松财;于浩

关键词:梅花鹿, S100A4基因, 克隆, 表达
摘要:目的 构建梅花鹿S100A4基因重组质粒,并进行原核表达,为研究S100A4蛋白在鹿茸发生中的作用机制奠定基础. 方法 梅花鹿锯茸血细胞中提取总RNA并进行反转录,用设计的特异性引物扩增梅花鹿S100A4基因,PCR产物克隆到pMD18-T载体并测序.将扩增的S100A4基因片段和原核表达质粒pET 28a(+)分别用EcoR Ⅰ和HindⅢ双酶切并连接,再将重组质粒转入BL21 (DE3),用TPIG表达菌株进行诱导表达. 结果 序列分析显示,梅花鹿S100A4基因与牛S100A4基因同源性高,为98.4%.酶切鉴定显示,表达梅花鹿S100A4基因重组质粒pET28aS100A4构建成功,SDS-PAGE电泳检测表达蛋白分子质量单位为12 ku,与预期值相符. 结论 构建了梅花鹿S100A4基因重组质粒,并在大肠埃希菌中成功表达梅花鹿S100A4蛋白,为研究S100A4蛋白在鹿茸生长过程中的作用机制奠定了基础.