期刊简介
本刊坚持以马克思主义、毛泽东思想为指导，遵循党的基本路线，贯彻理论与实践相结合，普及与提高相结合，“百花齐放，百家争鸣”的方针，坚持面向科研、教学、临床和防治，充分反映我国病原生物学的研究水平，促进我国病原生物学事业的发展。
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首页>中国病原生物学杂志
- 杂志名称：中国病原生物学杂志
- 主管单位：中国寄生虫病防治杂志
- 主办单位：中华人民共和国卫生部
- 国际刊号：11-5457/R
- 国内刊号：11-5457/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中华预防医学会、系列杂志优秀期刊期刊收录：上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
应用pET32a(+)载体表达尘螨变应原Der f 3及其产物IgE反应性鉴定
崔玉宝；周鹰；王楠；俞黎黎；卞勇华；杨李；张承伯
关键词：尘螨, 变应原, 基因表达, 蛋白质纯化
摘要：目的 获得粉尘螨变应原第3组分Der f 3原核表达产物并检测其与尘螨过敏性哮喘患儿血清抗体IgE反应性. 方法 酶切质粒pET28a(+)-Der f 3获得目的基因Der f 3,将其与pET32a载体连接成质粒pET32 a (+)-Der f3,转化BL21细菌,用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,用Ni+离子亲和层析柱纯化表达产物,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、Western blot和质谱鉴定纯化产物.以纯化产物为包被抗原,采用间接ELISA检测尘螨过敏性哮喘患儿血清抗体反应情况. 结果 成功构建了原核表达质粒pET32 a(+)-Der f 3.将该质粒转化E.coli BL21诱导表达,亲和层析纯化后经SDS-PAGE鉴定获得目的蛋白,Western blot验证该蛋白的能够与载体的组氨酸标签结合,质谱鉴定其结构与天然Der f 3一致.以此产物为包被抗原采用间接ELISA检测尘螨过敏性哮喘患儿血清,阳性率为29.73％ (11/37). 结论 成功构建了原核表达质粒pET32 a (+)-Der f 3,亲和纯化获得的目的蛋白具有良好的反应原性.
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