期刊简介

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  • 杂志名称:中国病原生物学杂志
  • 主管单位:中国寄生虫病防治杂志
  • 主办单位:中华人民共和国卫生部
  • 国际刊号:11-5457/R
  • 国内刊号:11-5457/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中华预防医学会、系列杂志优秀期刊期刊收录:上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
中国病原生物学杂志2014年第10期

双抗夹心ELISA检测犬粪贾第虫抗原方法的建立及应用

宋百军;刘原源;宫鹏涛;李建华;杨举;李赫;张西臣

关键词:贾第虫, 双抗夹心ELISA, 单克隆抗体, 贾第素α-12
摘要:目的 建立简便、特异的检测犬粪贾第虫抗原贾第素α-12的双抗夹心ELISA方法. 方法 利用辣根过氧化物酶标记抗贾第素α-12单克隆抗体4C9,通过过滤、超声的方法处理犬粪样品.以抗贾第素α-12单克隆抗体3H10为捕获抗体,5%脱脂奶粉作为封闭剂,辣根过氧化物酶标记的抗贾第素α-12单克隆抗体4C9为检测抗体,经底物显色后,用酶标仪测量490 nm处的吸光度(A)值.通过棋盘滴定法确定抗体适包被浓度、佳封闭剂、待检粪液佳稀释度及酶标抗体佳稀释度.应用建立的ELISA方法对122份犬粪样品进行检测. 结果 建立的双抗夹心ELISA检测标准阳性样品的A490为0.465,标准阴性样品的A490为0.098;优化的佳检测条件为:抗体包被浓度为0.01 mg/ml,封闭剂为1% BSA,粪液稀释度为1∶2,酶标二抗稀释度为1∶400,该试验与犬等孢球虫、犬隐孢子虫、犬蛔虫样品均无交叉反应,批间和批内变异系数较小,重复性好.应用本方法对122份犬粪进行检测,阳性率为36.9%. 结论 建立的双抗夹心ELISA方法特异性高,重复性好,为贾第虫流行病学调查提供了一种更简便、快速、特异的免疫学检测方法.