期刊简介
本刊坚持以马克思主义、毛泽东思想为指导，遵循党的基本路线，贯彻理论与实践相结合，普及与提高相结合，“百花齐放，百家争鸣”的方针，坚持面向科研、教学、临床和防治，充分反映我国病原生物学的研究水平，促进我国病原生物学事业的发展。
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首页>中国病原生物学杂志
- 杂志名称：中国病原生物学杂志
- 主管单位：中国寄生虫病防治杂志
- 主办单位：中华人民共和国卫生部
- 国际刊号：11-5457/R
- 国内刊号：11-5457/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中华预防医学会、系列杂志优秀期刊期刊收录：上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
日本血吸虫热休克蛋白70(Sj HSP70)的抗体反应特征及免疫诊断价值
高玒；余传信；宋丽君；王玠；殷旭仁；沈双；姚媛；许永良；杨静
关键词：血吸虫, 日本, 热休克蛋白70, 表达, 抗体反应, 免疫诊断
摘要：目的 制备重组日本血吸虫中国大陆株热休克蛋白[rSj HSP70(Grp78)],检测其抗体反应特征及用于血吸虫病免疫诊断的价值.方法 以日本血吸虫中国大陆株成虫mRNA为模板逆转录合成cDNA,采用基因特异性引物,通过PCR技术扩增编码Sj HSP70(Grp78)成熟肽的基因片段,并将该片段插入到表达质粒pET28a(+)中,构建表达质粒HSP70(Grp78)-pET28a.将重组质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达后采用镍亲和层析法制备纯化的可溶性rSj HSP70(Grp78).采用酶联免疫吸附试验(ELISA)及Western blot检测rSj HSP70(Grp78)的抗体反应特异性及抗rSj HSP70(Grp78) IgG在血吸虫感染小鼠血清中动态变化,以分析其早期诊断与疗效考核价值,并比较rSj HSP70(Grp78)-ELISA与SEA-ELISA检测血吸虫感染者血清抗体IgG的敏感性与特异性.结果 编码Sj SP70(Grp78)成熟肽基因片段克隆成功,并获得纯化的分子质量单位约69 ku的重组表达Sj HSP70 (Grp78)蛋白.Western blot显示Sj HSP70(Grp78)蛋白能被日本血吸虫感染的小鼠及人血清识别,但不与华支睾吸虫病和卫氏并殖吸虫病患者血清及健康人、鼠血清反应.感染小鼠血清抗Sj HSP70(Grp78) IgG水平与血吸虫感染度呈正相关,并随着感染时间延长呈增强趋势,在感染后16～18周达到峰值,随后开始回调,但始终维持在较高水平.治疗组小鼠经药物治疗后第2周(感染后第8周),体内抗体水平迅速上升并达到高峰,经过短暂下降后再次上升,出现第二个高峰,随后逐渐回调,至治疗16周(感染后第22周),部分小鼠抗体水平已接近阴性阈值.部分个体在血吸虫感染后1周即可检测到血清抗rSj HSP70(Grp78) IgG.分别以rSj HSP70(Grp78)和SEA血吸虫、华支睾吸虫及卫氏并殖吸虫感染者血清及健康人血清,敏感性分别为82.9％和95.7％,特异性分别为94.3％和85.7％,与健康人血清的交叉反应率分别为0和16.67％,与华支睾吸虫感染者血清的交叉反应率分别为5.7％和14.29％;与卫氏并殖吸虫感染者血清的交叉反应率分别为5％和65％.结论 Sj HSP70 (Grp78)具有高度的抗原特异性,以此为抗原采用ELISA检测抗Sj HSP70(Grp78) IgG具有日本血吸虫病辅助诊断价值,并具有一定的早期诊断与疗效考核潜能.
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