期刊简介

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  • 杂志名称:中国病原生物学杂志
  • 主管单位:中国寄生虫病防治杂志
  • 主办单位:中华人民共和国卫生部
  • 国际刊号:11-5457/R
  • 国内刊号:11-5457/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中华预防医学会、系列杂志优秀期刊期刊收录:上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
中国病原生物学杂志2014年第06期

粉尘螨全长cDNA文库的构建及初步鉴定

卞勇华;周鹰;俞黎黎;孙金霞;杨李;滕飞翔;崔玉宝

关键词:粉尘螨, cDNA文库, 构建, 鉴定
摘要:目的 构建粉尘螨全长cDNA文库,为粉尘螨相关基因研究奠定基础. 方法 用RNAiso Reagent试剂盒提取粉尘螨总RNA,然后以SMART IVTM Oligo-nucleotide和CDSⅢ/3' PCR Primer为引物,在反转录酶作用下合成cD-NA第1链,利用LD-PCR方法合成cDNA第2链.合成的双链cDNA经蛋白酶K消化及Sfi Ⅰ酶切,得到的cDNA克隆入λTripIEx2载体中,构建粉尘螨全长cDNA文库,测定分析文库滴度及插入片段大小. 结果 成功构建粉尘螨全长cDNA文库.检测cDNA文库未扩增时滴度为7.3×106 pfu/ml,文库扩增后滴度为5.0×109 pfu/ml,插入片段为0.5~2.5 kb,平均1.2 kb左右. 结论 成功构建了高质量的粉尘螨全长cDNA表达文库,所建文库容量及插入片段大小适用于对粉尘螨相关基因的进一步研究.