期刊简介
本刊坚持以马克思主义、毛泽东思想为指导，遵循党的基本路线，贯彻理论与实践相结合，普及与提高相结合，“百花齐放，百家争鸣”的方针，坚持面向科研、教学、临床和防治，充分反映我国病原生物学的研究水平，促进我国病原生物学事业的发展。
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首页>中国病原生物学杂志
- 杂志名称：中国病原生物学杂志
- 主管单位：中国寄生虫病防治杂志
- 主办单位：中华人民共和国卫生部
- 国际刊号：11-5457/R
- 国内刊号：11-5457/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中华预防医学会、系列杂志优秀期刊期刊收录：上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
柔嫩艾美尔球虫病毒RDRP部分序列的克隆及原核表达
武斌；宫鹏涛；张西臣；李建华
关键词：柔嫩艾美尔球虫病毒, RdRp, 基因克隆, 原核表达
摘要：目的 构建柔嫩艾美尔球虫病毒RNA依赖RNA聚合酶(RDRP)蛋白部分Ⅸ段的原核表达重组质粒,并在大肠埃希菌中表达目的蛋白. 方法 根据柔嫩艾美尔球虫病毒RDRP基因序列设计引物,以病毒基因组dsRNA为模板,RT-PCR扩增目的片段;扩增产物与pMD-18T克隆载体相连接,经测序鉴定序列正确后,将该质粒酶切,酶切目的片段与原核表达载体pET-28a连接构建原核表达质粒,转化入Transetta(DE3)中,经IPTG诱导表达重组蛋白,用SDSPAGE和Western blot分析目的蛋白表达. 结果 成功克隆柔嫩艾美尔球虫病毒RDRP基因部分序列,其长度为1 330 bp,DNA测序表明重组原核表达质粒构建成功,推导的编码氨基酸序列与GenBank中布氏艾美尔球虫病毒RDRP氨基酸序列同源区段同源性为36％.经SDS-PAGE和Western blot分析,柔嫩艾美尔球虫病毒部分RDRP蛋白得到表达,表达蛋白的分子质量单位为52 ku,与理论值相符,且该重组蛋白可被His标签单克隆抗体识别. 结论 构建的重组原核表达载体pET 28a-RDRP在大肠埃希菌中高效表达柔嫩艾美尔球虫病毒RDRP蛋白部分区段,为进一步研究该病毒奠定了基础.
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