期刊简介
本刊坚持以马克思主义、毛泽东思想为指导，遵循党的基本路线，贯彻理论与实践相结合，普及与提高相结合，“百花齐放，百家争鸣”的方针，坚持面向科研、教学、临床和防治，充分反映我国病原生物学的研究水平，促进我国病原生物学事业的发展。
往期目录
-
2000
-
2001
-
2002
-
2003
-
2004
-
2005
-
2006
-
2007
-
2008
-
2009
-
2010
-
2011
-
2012
-
2013
-
2014
-
2015
-
2016
-
2017
-
2018
首页>中国病原生物学杂志
- 杂志名称：中国病原生物学杂志
- 主管单位：中国寄生虫病防治杂志
- 主办单位：中华人民共和国卫生部
- 国际刊号：11-5457/R
- 国内刊号：11-5457/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中华预防医学会、系列杂志优秀期刊期刊收录：上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
刚地弓形虫RH株ROP18基因真核表达载体的构建
郭玲玲；张晓磊；张进顺；贾晓晖；姜文静；王春苗；刘楠
关键词：刚地弓形虫, 棒状体蛋白18, 重组质粒, 真核表达
摘要：目的 PCR扩增刚地弓形虫(Toxplasma gondii)棒状体蛋白18 (ROP18)基因,构建真核表达载体pVAX1-ROP18,并检验其在真核细胞中的表达.方法 ROP18基因和质粒pVAX1分别经HindⅢ和BamH I双酶切,在T4连接酶作用下连接过夜,将连接产物转化至大肠埃希菌E.coil XL1-Blue感受态细胞,经菌落PCR、双酶切及测序正确的重组质粒pVAX1-ROP18转染至HeLa细胞内.试验设空白对照组和pVAX1空质粒对照.提取各组HeLa细胞的总RNA并将其逆转录成cDNA,分别进行管家基因β-actin和ROP18基因的RT-PCR扩增;采用Western blot法检测转染后各组细胞ROP18蛋白的表达情况.结果 经0.8％琼脂糖凝胶电泳检测,ROP18基因的RT-PCR扩增片段大小为1665bp,与预期值相符;ROP18基因重组质粒转化菌菌落PCR产物经0.8％琼脂糖凝胶电泳鉴定,大小为1665bp,与预期值相符;双酶切重组质粒得到预期酶切片段;重组质粒的目的基因序列与弓形虫RH株ROP18基因(登录号AM075204.1)序列比对完全一致.脂质体转染后各组β-actin的RT-PCR扩增目的片段均为613bp,与预期值相符;pVAX1-ROP18重组质粒转染组的ROP18的RT-PCR扩增目的片段大小为1665bp,而其他组无该目的基因条带.Western blot检测重组质粒pVAX1-ROP18能够在HeLa细胞内表达ROP18蛋白.结论 成功构建了真核表达载体pVAX1-ROP18,且该重组质粒能够在真核细胞内表达ROP18蛋白.
友情链接