期刊简介

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  • 杂志名称:中国病原生物学杂志
  • 主管单位:中国寄生虫病防治杂志
  • 主办单位:中华人民共和国卫生部
  • 国际刊号:11-5457/R
  • 国内刊号:11-5457/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中华预防医学会、系列杂志优秀期刊期刊收录:上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
中国病原生物学杂志2015年第10期

稳定过表达miR-126的LOVO细胞系的建立及miR-126功能研究

张雪锋;高彦君;王穗海;李纪良

关键词:miR-126, 病毒感染, 稳定表达, 转移
摘要:目的 构建过表达miR-126基因的结肠癌LOVO重组细胞系,观察miR-126在体外对该细胞增殖、转移的影响. 方法 用慢病毒lv-has-miR-126感染LOVO细胞,采用流式细胞术检测表达绿色荧光蛋白的细胞并进行RT-PCR鉴定;采用CCK-8试验和平板克隆形成试验检测细胞在体外的增殖情况,采用transwell试验检测细胞在体外的转移情况. 结果 用慢病毒感染LOVO细胞,流式细胞仪检测绿色荧光蛋白的表达量(感染率>75%),Real-Time定量PCR检测结果表明,高表达组细胞中miR-126的表达量明显升高,而VEGF表达量下降,干扰组细胞中miR-126的表达量明显降低,VEGF表达量上升(P<0.05).提示成功构建了稳定高表达的miR-126的结肠癌细胞株.体外CCK8增值实验及平板克隆形成试验显示miR-126上调后细胞生长及克隆数较对照组无显著差异(P>0.05),体外迁移和侵袭实验证实高表达miR-126的LOVO细胞中,其细胞迁移和侵袭的细胞数目明显对于对照组,且差异有统计学意义(P<0.05).可见miR-126在体外促进了LOVO细胞的转移. 结论 成功构建了高表达miR-126的LOVO重组细胞系,初步证实miR-126在体外对LOVO细胞的转移有促进作用.