期刊简介
本刊坚持以马克思主义、毛泽东思想为指导,遵循党的基本路线,贯彻理论与实践相结合,普及与提高相结合,“百花齐放,百家争鸣”的方针,坚持面向科研、教学、临床和防治,充分反映我国病原生物学的研究水平,促进我国病原生物学事业的发展。
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首页>中国病原生物学杂志

- 杂志名称:中国病原生物学杂志
- 主管单位:中国寄生虫病防治杂志
- 主办单位:中华人民共和国卫生部
- 国际刊号:11-5457/R
- 国内刊号:11-5457/R
- 出版周期:月刊
期刊荣誉:中华预防医学会、系列杂志优秀期刊期刊收录:上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
恶性疟原虫3D7株新型裂殖子蛋白质(PF3D7_1361800)的表达纯化及多克隆抗体的制备
魏晓艳;姜宁;周健华;常志广;赵欣;土志伟;余胜超;韩悦;黄朋
关键词:疟原虫, 恶性, 裂殖子, 原核表达, 多克隆抗体
摘要:目的 用大肠埃希菌表达PF3D7_1361800蛋白,制备多克隆抗体. 方法 根据PF3D7_1361800蛋白的水溶性分析,设计目的基因引物,采用PCR技术扩增目的基因片段,长度为897 bp.将其克隆到pMD18-T载体,测序正确后将该片段连接到pET-28a和pGEX-4T-1表达载体中,测序鉴定正确后将重组质粒转化到大肠埃希菌BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL中,用0.1 mmol/L IPTG诱导表达,用His GraviTrapTM和Gluthat hione-Sepharose 4B亲和层析柱纯化目的蛋白质.用His-tag重组蛋白免疫家兔,每2周免疫一次,分别于免疫后14、28、42、52 d采血,用间接ELISA法测定抗体效价.以制备的多克隆抗体作为一抗,采用Western blot分析其特异性. 结果 经测序和酶切鉴定,成功构建了表达载体pET-PF3D7_1361800和pGEx-PF3D7_1361800.SDS-PAGE分析亲和纯化的重组蛋白纯度较好,间接ELISA法检测该蛋白免疫兔血清抗体效价>1∶16 000. 结论 成功克隆了PF3D7_1361800的表达载体并表达目的蛋白,制备的抗重组蛋白多克隆抗体具有特异性,为研究该蛋白质的生物学功能及疟疾疫苗的研发奠定了基础.
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