期刊简介
本刊坚持以马克思主义、毛泽东思想为指导,遵循党的基本路线,贯彻理论与实践相结合,普及与提高相结合,“百花齐放,百家争鸣”的方针,坚持面向科研、教学、临床和防治,充分反映我国病原生物学的研究水平,促进我国病原生物学事业的发展。
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首页>中国病原生物学杂志

- 杂志名称:中国病原生物学杂志
- 主管单位:中国寄生虫病防治杂志
- 主办单位:中华人民共和国卫生部
- 国际刊号:11-5457/R
- 国内刊号:11-5457/R
- 出版周期:月刊
期刊荣誉:中华预防医学会、系列杂志优秀期刊期刊收录:上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
曼氏迭宫绦虫亮氨酸氨基肽酶(SmLAP)的生物信息学分析、克隆及表达
杨祖婷;陈立强;符瑞佳;尹以婷;梁鹏;吕刚;梁培
关键词:曼氏迭宫绦虫, 亮氨酸氨基肽酶, 生物信息学, 原核表达, 免疫诊断分子
摘要:目的 利用生物信息学方法分析曼氏迭宫绦虫亮氨酸氨基肽酶(SmLAP)基因的结构和功能,并将该基因克隆至原核表达载体在大肠埃希菌中进行原核表达并纯化,为进一步研究其功能奠定基础. 方法 利用生物信息学相关软件,分析SmLAP基因及其编码蛋白的结构、生物学和免疫学功能特征.通过PCR扩增得到目的基因,克隆至原核表达载体pGEX-4T1中,转化感受态E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达的重组蛋白利用GST标签层析柱纯化,采用12% SDS-PAGE分析蛋白纯度. 结果 曼氏迭宫绦虫LAP基因ORF finder显示核酸序列为1 662 bp,编码554个氨基酸,预测在第21个氨基酸的位置出现信号肽.切除信号肽后的核酸序列为1 083 bp,编码360个氨基酸,理论分子质量单位为40 ku,与人LAP基因序列相似性为38%.将SmLAP和人B细胞抗原表位预测结果比对,相似度极低.构建的原核表达载体pGEX-4T1-SmLAP转化人大肠埃希菌后用IPTG进行诱导表达,目的蛋白主要以包涵体的形式存在.通过超声破碎、尿素溶解包涵体、透析、GST层析柱后获得单一组分的重组蛋白. 结论 构建的原核表达系统能表达SmLAP蛋白.生物信息学分析SmLAP是一个有潜在应用价值的免疫诊断分子,且主要以包涵体形式存在.
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