期刊简介

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  • 杂志名称:中国病原生物学杂志
  • 主管单位:中国寄生虫病防治杂志
  • 主办单位:中华人民共和国卫生部
  • 国际刊号:11-5457/R
  • 国内刊号:11-5457/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中华预防医学会、系列杂志优秀期刊期刊收录:上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
中国病原生物学杂志2016年第06期

双抗体夹心ELISA定量检测狂犬病病毒糖蛋白方法的建立及初步应用

孙宏宇;王化磊;金宏丽;李岭;闫飞虎;曹增国;冯娜;王铁成;徐盾

关键词:狂犬病病毒, 双抗体夹心ELISA, 糖蛋白, 抗原定量检测
摘要:目的 定量检测狂犬病病毒病毒样颗粒糖蛋白含量. 方法 以狂犬病病毒糖蛋白单克隆抗体作为捕获抗体,狂犬病病毒多克隆抗体作为检测抗体,标准品为以细胞半数感染量(TCID50)准确定量的狂犬病病毒SRV9毒株病毒液,建立检测狂犬病病毒糖蛋白(RABV-GP)含量的双抗体夹心ELISA检测方法,对各反应条件进行优化并分析其特异性、重复性和灵敏度. 结果 双抗体夹心ELISA定量检测方法佳工作条件为:狂犬病病毒糖蛋白蛋白单克隆抗体包被浓度为2.5 μg/ml,4℃包被过夜;1% BSA,37℃封闭2h;狂犬病病毒多克隆抗体1∶200稀释,37℃孵育1.5h;酶标二抗1∶5 000稀释,37℃孵育1 h;TMB室温避光显色30 min. 结论 该方法可特异性定量检测狂犬病病毒,与犬细小病毒、犬瘟热病毒和犬传染性肝炎病毒均不发生反应.该方法线性检测范围为1×104~1.0×107 TCID50/ml,平均批内变异系数小于6%,平均批间变异系数小于8%.