期刊简介

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  • 杂志名称:中国病原生物学杂志
  • 主管单位:中国寄生虫病防治杂志
  • 主办单位:中华人民共和国卫生部
  • 国际刊号:11-5457/R
  • 国内刊号:11-5457/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中华预防医学会、系列杂志优秀期刊期刊收录:上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
中国病原生物学杂志2016年第05期

重组H7N9亚型流感病毒血凝素(HA)的表达及鉴定

孟令楠;任志广;冀显亮;李元果;李胜楠;于志君;孙伟洋;国娇;赵永坤

关键词:流感病毒, H7N9HA蛋白, 杆状病毒表达系统
摘要:目的 为了获得H7N9HA蛋白,利用昆虫杆状病毒表达系统表达了 H7N9HA基因并获得重组H7N9亚型流感病毒HA蛋白. 方法 将H7N9亚型流感病毒的HA蛋白基因扩增并克隆到pFastBac Ⅰ载体中,构建重组穿梭质粒,转染昆虫sf9细胞后获得重组杆状病毒,对大量培养后表达的H7N9 HA蛋白进行SDSPAGE、Western blot和间接免疫荧光检测.分别在0d和14d用纯化的表达产物HA蛋白免疫小鼠. 结果 测序鉴定重组表达载体构建正确;SDS-PAGE显示纯化的表达蛋白分子质量为67 ku;Western blot分析该蛋白能够被鸡抗流感病毒IgG识别;鸡抗流感病毒抗体间接免疫荧光法测定HA蛋白的表达,在感染HA的昆虫细胞中出现特异性荧光. 结论 成功的表达JH7N9的HA蛋白,并且此HA蛋白能成功的诱导小鼠体内的免疫反应,并起到良好的保护作用.