期刊简介

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  • 杂志名称:中国病原生物学杂志
  • 主管单位:中国寄生虫病防治杂志
  • 主办单位:中华人民共和国卫生部
  • 国际刊号:11-5457/R
  • 国内刊号:11-5457/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中华预防医学会、系列杂志优秀期刊期刊收录:上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
中国病原生物学杂志2016年第01期

红斑丹毒丝菌C43065株甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因的克隆与表达

江波拉提·松哈提;恩特马克·布拉提白;吾鲁木汗·那孜尔别克

关键词:红斑丹毒丝菌, 甘油醛-3-磷酸脱氢酶, 基因克隆, 原核表达
摘要:目的 克隆和表达红斑丹毒丝菌甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)基因. 方法 采用PCR从红斑丹毒丝菌C43065株基因组中扩增编码GAPDH的gapC基因片段,将其克隆至原核表达载体pET32a(+)的BamH Ⅰ和Kpn Ⅰ多克隆位点上,构建重组载体pET32a-gapC,转化大肠埃希菌BL21 (DE3),在IPTG诱导下表达N端带有Trx的重组蛋白GapC,用SDS-PAGE和Western blot检测表达产物. 结果 扩增得到的C43065株gapC基因片段大小为1 005 bp,与已报道的红斑丹毒丝菌Fujisawa株gapC基因核苷酸序列的同源性为99%.SDS-PAGE结果显示表达蛋白分子质量单位约为57 ku,与预期的大小相近.Western blot检测结果显示表达的重组蛋白GapC能与抗6个组氨酸标签鼠单克隆抗体发生特异性反应. 结论 用大肠埃希菌表达系统成功表达GapC蛋白,可用于红斑丹毒丝菌GapC生物学功能的进一步研究.