期刊简介
本刊坚持以马克思主义、毛泽东思想为指导，遵循党的基本路线，贯彻理论与实践相结合，普及与提高相结合，“百花齐放，百家争鸣”的方针，坚持面向科研、教学、临床和防治，充分反映我国病原生物学的研究水平，促进我国病原生物学事业的发展。
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首页>中国病原生物学杂志
- 杂志名称：中国病原生物学杂志
- 主管单位：中国寄生虫病防治杂志
- 主办单位：中华人民共和国卫生部
- 国际刊号：11-5457/R
- 国内刊号：11-5457/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中华预防医学会、系列杂志优秀期刊期刊收录：上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
应用SOE PCR方法构建新城疫病毒基因起始片段的研究
南福龙；陈兴；张赫；解长占；崔卓栋；张萍；张金勇；庄忻宇；鲁会军；金宁一
关键词：新城疫病毒, SOE PCR, 基因克隆, 拼接
摘要：目的 以猪源新城疫病毒JL02/2000株为模板,构建新城疫病毒反向遗传研究所需的基因起始片段. 方法 将NDV起始片段(ND1,226-4 916 bp)设计拆分为ND1-1、ND1-2、ND1-3、ND1-4的4个约1.2kb的小片段,分别PCR扩增各片段,后采用SOE PCR技术将ND1-1、ND1-2拼接成中间片段ND1-1-2,将ND1-3、ND1-4拼接为ND1-3-4,再经第二次SOE-PCR整合拼接ND1-1-2和ND1-3-4片段,完成NDV起始片段ND1的构建,并连接到pCI载体上,构建pCI-ND1质粒,后经酶切PCI-ND1质粒并送测序鉴定目的片段是否构建正确并成功连接到pCI载体上. 结果 经PCR扩增得到ND1-1、ND1-2、ND1-3、ND1-4共4个分别约1 200 bp大小的片段,经第一轮SOE-PCR得到ND1-1-2和ND1-3-4两个2 200 bp左右的片段,第二轮SOE-PCR得到4 900 bp左右的ND1片段.连接产物PCI-ND1质粒经酶切和测序鉴定片段大小和序列与预期相符. 结论 成功构建了新城疫病毒基因起始片段(226-4 916 bp),为构建新城疫病毒全长基因奠定了基础.
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