期刊简介
本刊坚持以马克思主义、毛泽东思想为指导，遵循党的基本路线，贯彻理论与实践相结合，普及与提高相结合，“百花齐放，百家争鸣”的方针，坚持面向科研、教学、临床和防治，充分反映我国病原生物学的研究水平，促进我国病原生物学事业的发展。
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首页>中国病原生物学杂志
- 杂志名称：中国病原生物学杂志
- 主管单位：中国寄生虫病防治杂志
- 主办单位：中华人民共和国卫生部
- 国际刊号：11-5457/R
- 国内刊号：11-5457/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中华预防医学会、系列杂志优秀期刊期刊收录：上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
刚地弓形虫ROP16-ROP18复合基因真核表达载体的构建
刘楠；张晓磊；郭玲玲；张进顺；贾晓晖；刘荣荣
关键词：刚地弓形虫, 棒状体蛋白16, 棒状体蛋白18, 复合重组质粒, 真核表达
摘要：目的 构建刚地弓形虫棒状体蛋白16(TgROP16)、棒状体蛋白18 (TgROP18)复合基因真核表达重组质粒,并验证其在真核细胞中的表达情况. 方法 重组质粒pVAX1-ROP16与pVAX1-ROP18分别经EcoR Ⅰ和Not Ⅰ、NheⅠ和AflⅡ双酶切,将ROP16与ROP18基因先后克隆至双启动子真核表达载体质粒pVAXD的多克隆位点中,构建pVAXD-ROP16-ROP18重组质粒.分别用双酶切和PCR验证正确的重组质粒及对照组质粒转染Hela细胞,提取细胞总RNA并逆转录为cDNA,以此为模板进行ROP16基因、ROP18基因与管家基因β肌动蛋白基因的RT-PCR扩增,采用间接免疫荧光法检测各自基因的表达. 结果 重组质粒pVAXD-ROP16-ROP18经PCR及双酶切鉴定构建正确.转染后经RT-PCR检测,实验组与对照组β肌动蛋白基因扩增产物均与预期大小相符,实验组ROP16基因、ROP18基因扩增产物分别为1 700 bp和2 100 bp,与预期大小相符,而对照组均未扩增出ROP16及ROP18基因.间接免疫荧光法检测显示,重组质粒pVAXD-ROP16、pVAXD-ROP18转染组细胞可见绿色荧光,空质粒及对照组无绿色荧光. 结论 成功构建了重组质粒pVAXD-ROP16-ROP18,该质粒可在真核细胞中表达.
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