期刊简介
本刊坚持以马克思主义、毛泽东思想为指导，遵循党的基本路线，贯彻理论与实践相结合，普及与提高相结合，“百花齐放，百家争鸣”的方针，坚持面向科研、教学、临床和防治，充分反映我国病原生物学的研究水平，促进我国病原生物学事业的发展。
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首页>中国病原生物学杂志
- 杂志名称：中国病原生物学杂志
- 主管单位：中国寄生虫病防治杂志
- 主办单位：中华人民共和国卫生部
- 国际刊号：11-5457/R
- 国内刊号：11-5457/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中华预防医学会、系列杂志优秀期刊期刊收录：上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
手足口病柯萨奇病毒A2、A4和A5型SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立
吕莉琨；杨东靖；李力；谭昭麟；李佳萌；苏旭
关键词：SYBR Green Ⅰ实时荧光定量聚合酶链反应, 柯萨奇病毒A2型, 柯萨奇病毒A4型, 柯萨奇病毒A5型
摘要：目的 建立一种快速、灵敏、特异的SYBR GreenⅠ实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(rRT-PCR)方法,以期用于检测柯萨奇病毒A2、A4和A5型. 方法 根据3种病毒vp1基因保守序列设计特异性引物,建立并优化SYBR GreenⅠ rRT-PCR方法.分别构建3种病毒的vp1部分基因的重组质粒作为病毒的体外转录标准品,分别以100～109和102～105倍稀释的标准品、其他6种肠道病毒、两种呼吸道RNA病毒及以临床诊断为手足口病的临床标本为模板,经过优化SYBR Green Ⅰ rRT-PCR反应条件,建立标准曲线和溶解曲线对其灵敏度、重复性、特异性进行评价,分析其临床应用中的效果. 结果 成功建立了3种柯萨奇病毒的SYBR GreenⅠ荧光定量rRT-PCR方法及定量标准曲线,方法的灵敏度为101copies/μ1质粒标准品,变异系数均＜2％,与柯萨奇病毒A组6、10、16型,肠道病毒EV71型,诺如病毒,轮状病毒,麻疹病毒和乙型流感病毒均无交叉反应.检测84份手足口病临床标本,阳性率分别为36.9％ (CVA4)、8.33％ (CVA5)和7.14％ (CVA2),经测序验证符合率为100％. 结论 建立的检测柯萨奇病毒A2、A4和A5型的SYBR GreenⅠ rRT-PCR方法具有良好的灵敏度、重复性和特异性,可用于手足口病病原体的分型检测.
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