期刊简介

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  • 杂志名称:中国病原生物学杂志
  • 主管单位:中国寄生虫病防治杂志
  • 主办单位:中华人民共和国卫生部
  • 国际刊号:11-5457/R
  • 国内刊号:11-5457/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中华预防医学会、系列杂志优秀期刊期刊收录:上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
中国病原生物学杂志2017年第01期

牛支原体P81蛋白的表达及纯化

马海彬;韩继成;孙文超;解长占;靖杰;肖朋朋;赵飞;张萍;鲁会军

关键词:牛支原体, P81蛋白, 原核表达, 蛋白纯化
摘要:目的 构建3种牛支原体P81蛋白原核表达质粒,分析其在大肠埃希菌中的表达情况,并纯化P81蛋白. 方法 根据GenBank发表的牛支原体P81基因序列(GenBank登录号:AY627040.1),密码子优化后合成P81全基因序列.构建原核表达质粒pET28a-P81、pET32a-P81和pGEX-6P-1-P81,经IPTG诱导后采用SDS-PAGE电泳分析P81蛋白在原核表达系统中的表达情况;应用Ni-NTA对目的蛋白进行纯化. 结果 pET28a-P81、pET32a-P81和pGEX-6P-1-P81均高效表达分子质量单位为78 ku左右的P81蛋白.表达产物进行Ni-NTA亲和层析,得到纯化的P81蛋白.结论 构建的重组原核表达质粒pET28a-P81、pET32a-P81、pGEX-6P-1-P81能在大肠埃希菌中高效表达牛支原体P81蛋白,为进一步分析该蛋白的抗原性奠定了基础.