期刊简介

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  • 杂志名称:中国病原生物学杂志
  • 主管单位:中国寄生虫病防治杂志
  • 主办单位:中华人民共和国卫生部
  • 国际刊号:11-5457/R
  • 国内刊号:11-5457/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中华预防医学会、系列杂志优秀期刊期刊收录:上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
中国病原生物学杂志2018年第07期

寨卡病毒E蛋白的原核表达及鉴定

张涵;曹亮;鲁会军;田明尧;孙文超;郭丹丹;汪伟;金宁一;李太元

关键词:寨卡病毒, E蛋白, 原核表达, 鉴定
摘要:目的 应用原核表达载体pET-28a表达ZIKV主要结构蛋白E蛋白, 并对反应条件进行优化, 为ZIKV亚单位疫苗的研究奠定基础.方法 从GenBank检索ZIKV基因组, 合成E基因并进行密码子优化, 以提高原核表达效率.设计引物, 以合成的E基因为模板PCR扩增ZIKV E基因, 用BamHI和HindIII进行双酶切后连接表达载体pET-28a, 构建原核表达重组质粒pET28a-ZIKV E, 转化大肠埃希菌BL21 (DE3) 进行目的蛋白的表达, 并对适IPTG诱导浓度进行优化.结果 pET28a-ZIKV E经酶切及测序鉴定均构建正确.用重组质粒转化DE3, 当加入IPTG终浓度为2mmol/L, 成功表达出分子质量单位 (Mr) 为56×103重组ZIKV E蛋白, 与理论分子质量相符合.Western blot检测重组蛋白可被His标签抗体识别.结论 成功构建原核重组载体pET-28a-ZIKV E, 表达的重组蛋白具有免疫反应性, 为ZIKV亚单位疫苗的研制奠定了基础.