期刊简介

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  • 杂志名称:中国病原生物学杂志
  • 主管单位:中国寄生虫病防治杂志
  • 主办单位:中华人民共和国卫生部
  • 国际刊号:11-5457/R
  • 国内刊号:11-5457/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中华预防医学会、系列杂志优秀期刊期刊收录:上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
中国病原生物学杂志2018年第06期

幽门螺杆菌TaqMan MGB探针双重荧光定量PCR检测方法的建立

荣倩玉;陈醒醒;刘艺凝;徐正;丁雲飞;吴玉龙;季晓飞;张莹;李波清

关键词:幽门螺杆菌, CagA, VacA, MGB双重荧光定量PCR技术
摘要:目的 建立用于幽门螺杆菌快速定量检测和分型的TaqMan MGB探针双重荧光定量PCR方法. 方法 采用Primer Premier 5软件分析设计引物和探针,采用双重荧光定量PCR扩增幽门螺杆菌CagA和VacA基因片段,建立循环数与拷贝数关系的标准曲线.检测临床标本中所含幽门螺杆菌的循环数,用该方法对临床胃黏膜标本进行检测并与标准曲线对比,计算所含幽门螺杆菌的拷贝数. 结果 建立的TaqMan MGB双重荧光定量PCR方法检测幽门螺杆菌质粒的线性范围是102~108拷贝/μl,CagA和VacA基因标准曲线的相关系数分别是0.977 8和0.990 4.29份临床胃黏膜标本的CagA和VacA基因循环数Ct值分别在29~35和30~35之间,幽门螺杆菌拷贝数分别在1.0×101.39~1.0×103.87和1.0×103.06~1.0×103.91之间,且临床标本中的幽门螺杆菌均为Ⅰ型. 结论 建立的TaqMan MGB双重荧光定量PCR法具有敏感、精确、快速的特点,可用于幽门螺杆菌的快速定量检测与分型鉴定.