期刊简介

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  • 杂志名称:中国病原生物学杂志
  • 主管单位:中国寄生虫病防治杂志
  • 主办单位:中华人民共和国卫生部
  • 国际刊号:11-5457/R
  • 国内刊号:11-5457/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中华预防医学会、系列杂志优秀期刊期刊收录:上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
中国病原生物学杂志2018年第06期

基于颜色判定的环介导等温扩增检测人型支原体的研究

龚杰;冉梦龙;吴伟伟;刘立雍;何利华;孟凡亮;赵飞

关键词:人型支原体, 环介导等温扩增技术, 临床标本, 分子诊断
摘要:目的 建立一种基于颜色判定的快速、灵敏、简便的人型支原体环介导等温扩增(LAMP)方法. 方法 使用PrimerExplorer V5软件设计针对人型支原体MHO_2540基因保守区域的4条特异等温扩增引物,用羟基萘酚蓝(H NB)作为结果判读指示剂并优化体系中dNTPs、MgSO4浓度,建立人型支原体LAMP检测方法,进行灵敏度、特异度等的检测并与普通PCR比较. 结果 LAMP对标准浓度人型支原体核酸的检测限约为102 CFU,与普通PCR相同,但比实时荧光定量PCR差一个数量级.人型支原体阳性临床标本拷贝数>103 CFU者LAMP阳性率100%,与普通PCR检出率(100%)一致,拷贝数101~103 CFU的弱阳性标本LAMP检出率为63.6%(14/22),普通PCR检出率为31.8%(7/22),差异有统计学意义(x2=4.46,P<0.05). 结论 LAMP检测人型支原体敏感、特异且操作简便,可在基层推广应用.