期刊简介

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  • 杂志名称:中国病原生物学杂志
  • 主管单位:中国寄生虫病防治杂志
  • 主办单位:中华人民共和国卫生部
  • 国际刊号:11-5457/R
  • 国内刊号:11-5457/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中华预防医学会、系列杂志优秀期刊期刊收录:上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
中国病原生物学杂志2018年第06期

梅毒螺旋体蛋氨酸亚砜还原酶的原核表达、纯化及其抗氧化功能研究

郑艾娟;李杰;赵兰华

关键词:梅毒螺旋体, 蛋氨酸亚砜还原酶, 蛋白表达, 抗氧化
摘要:目的 原核表达、纯化梅毒螺旋体(Treponema pallidum)蛋氨酸亚砜还原酶(Methionine sulfoxide reductase,Msr)并测定其抗氧化功能. 方法 将TpMsr基因连接到表达载体pET28a,构建重组质粒pET28a-TpMsr,热激法将其转化大肠埃希菌BL21 (DE3)得到重组菌BL/pET28a-TpMsr,IPTG诱导重组TpMsr蛋白表达.利用镍柱亲和层析纯化目的蛋白,采用比色法测定Tp Msr蛋白的酶活性.采用菌落计数法测定重组大肠埃希菌在H2O2胁迫下的存活率. 结果 成功构建重组质粒pET28a-TpMsr,转化大肠埃希菌BL21 (DE3)后高效表达分子质量单位(Mr)约34.8×103的TpMsr,经Ni2+柱亲和层析纯化得到高纯度的重组TpMsr蛋白.该蛋白能将蛋氨酸亚枫还原为蛋氨酸,且能赋予大肠埃希菌抵抗氧化应激的能力. 结论 构建的重组质粒pET28a-TpMsr能表达TpMsr蛋白.该蛋白具有抗氧化功能,为研究梅毒螺旋体的抗氧化机制提供了实验依据.