期刊简介
本刊坚持以马克思主义、毛泽东思想为指导，遵循党的基本路线，贯彻理论与实践相结合，普及与提高相结合，“百花齐放，百家争鸣”的方针，坚持面向科研、教学、临床和防治，充分反映我国病原生物学的研究水平，促进我国病原生物学事业的发展。
往期目录
-
2000
-
2001
-
2002
-
2003
-
2004
-
2005
-
2006
-
2007
-
2008
-
2009
-
2010
-
2011
-
2012
-
2013
-
2014
-
2015
-
2016
-
2017
-
2018
首页>中国病原生物学杂志
- 杂志名称：中国病原生物学杂志
- 主管单位：中国寄生虫病防治杂志
- 主办单位：中华人民共和国卫生部
- 国际刊号：11-5457/R
- 国内刊号：11-5457/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中华预防医学会、系列杂志优秀期刊期刊收录：上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
MERS-CoV S1蛋白的表达及鉴定
胡星星；邱泊宁；迟航；王化磊；王翀；盖微微；金宏丽；黄培；冯娜；王铁成；高玉伟；赵永坤；杨松涛；夏咸柱
关键词：MERS-CoV, S1蛋白, 表达, 纯化, 鉴定
摘要：目的 真核表达具有天然构象的中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV) S1蛋白,并进行免疫反应性鉴定.方法 以pcDNA3.1-S重组质粒为模板,PCR扩增S1基因,连接至pFastBacl质粒,构建重组质粒pFB1-S1.将pFB1-S1转化至DH10Bac感受态中,构建重组杆粒BpFB1-S1,然后转染sf9细胞获得重组杆状病毒rpFB1-S1并连续传代.将第四代rpFB1-S1接种sf9细胞后悬浮培养96 h,取上清,用PEG8000浓缩并进行免疫亲和层析纯化,采用SDS-PAGE和Western blot鉴定其分子质量及免疫反应性;另取感染rpFB1-S1 48 h的sf9细胞进行IFA鉴定. 结果 S1基因PCR扩增产物大小为2 212 bp,与预期相符.重组质粒pFB1-S1经酶切和测序分析鉴定构建正确.重组杆粒BpFB1-S1经PCR鉴定构建正确.IFA试验可见感染rpFB1-S1的sf9细胞出现特异性绿色荧光,即有目的蛋白表达.SDS—PAGE显示纯化的重组S1为单一100×103 (Mr)蛋白条带,Western blot检测该蛋白能被鼠抗S-RBD蛋白单克隆抗体识别. 结论 成功表达了具有免疫反应性的MERS-CoV S1蛋白,为MERS-CoV快速诊断方法的建立及候选疫苗的构建奠定了基础.
友情链接