期刊简介

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  • 杂志名称:中国病原生物学杂志
  • 主管单位:中国寄生虫病防治杂志
  • 主办单位:中华人民共和国卫生部
  • 国际刊号:11-5457/R
  • 国内刊号:11-5457/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中华预防医学会、系列杂志优秀期刊期刊收录:上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
中国病原生物学杂志2018年第01期

苏丹型埃博拉病毒糖蛋白原核表达及抗体间接ELISA检测方法的建立

吴芳芳;曹增国;焦翠翠;王琪;迟航;侯朋飞;黄培;金宏丽;赵永坤;李忠义;王化磊;杨松涛;夏咸柱

关键词:苏丹型埃博拉病毒, 原核表达, 糖蛋白, ELISA
摘要:目的 原核表达苏丹型埃博拉病毒(Sudan virus,SUDV)糖蛋白(GP),并作为包被抗原建立抗体间接ELISA检测方法. 方法 PCR扩增SUDV GP基因片段,克隆至pET30a(+)表达载体,IPTG诱导表达SUDV GP,经His-Ni柱纯化,SDS-PADE和Western blot鉴定正确的SUDV GP作为包被抗原建立SUDV抗体间接ELISA方法,并对实验条件进行优化. 结果 SUDV GP在大肠杆菌中以包涵体的形式表达,建立的抗体间接ELISA检测方法佳SUDV GP包被量为2μg/孔,待检血清佳稀释度为1∶320,佳作用时间1.5h,HRP标记羊抗鼠IgG佳稀释度1∶10 000,TMB佳显色时间为7 min.该方法的特异性强,样品检测结果与已知血清的符合率为100%,检测SUDV阳性血清的敏感度为1∶40 960,SUDV GP批间及批内的实验结果变异系数(CV)均小于10%. 结论 成功表达SUDV GP并建立SUDV抗体间接ELISA检测方法,为疫苗免疫效果的评价、疫病的监测及SUDV抗体检测试剂盒的研发奠定了基础.